非洲豬瘟病毒間接 ELISA 抗體檢測試劑盒

非洲豬瘟抗體 ELISA 檢測試劑盒 （CAT.#：E25）

1.用途

用于檢測血清樣品中的非洲豬瘟病毒抗體水平。

2. 原理簡介 

本試劑盒采用間接 ELISA 法檢測血清中的非洲 豬瘟抗體。其基本原理如下：用重組蛋白抗原制備包 被微孔板，HRP 酶標記物為抗豬 IgG。檢測時，向微 孔板中加入稀釋后的待測樣品，洗板后，加入 HRP 標記抗體，如果血清中含有非洲豬瘟抗體，則抗體會 與酶標板上的包被的抗原結合，酶標抗體也會與血清 中的非洲豬瘟抗體結合，加入底物后，顏色反應的深 淺與樣品中存在的非洲豬瘟抗體的量成正比。 

3. 試劑盒組份 

1). 包被板：96T(12 條?8 孔，2 塊)。

2). 酶標記物：21.0ml/瓶，1 瓶。

3). 樣品稀釋液：100.0ml/瓶，1 瓶。含蛋白的緩沖液， 可作為陰性質控使用。

4). 陽性質控：1.0ml/瓶，1 瓶。含有非洲豬瘟抗體。

5). 洗液：60.0ml/瓶，1 瓶。20 倍濃縮液，用前稀釋。 含有非離子去垢劑。 

6). 底物 A：14.0ml/瓶，1 瓶。含有過氧化氫的緩沖 液。

7). 底物 B：14.0ml/瓶，1 瓶。含有 TMB 的緩沖液。

8). 終止液：14.0ml/瓶，1 瓶。含有硫酸的緩沖液。

9). 板貼、說明書、自封袋：1 套。

4. 注意事項

1). 不同批次的組份不可混用，且只能在效期內使 用。

2). 如果待檢標本含有懸浮物、絮狀物等不溶物，請 離心去除。且含有疊氮鈉的標本不可用。

5. 試劑準備

1). 測試前將試劑盒組份置于室溫(18-25℃)平衡 30 分鐘，測試后應立即放回 2-8℃保存。 

2). 洗滌液：將濃縮洗液按照 20 倍比例用蒸餾水稀 釋，混勻后備用。 

3). 樣品準備：按照常規方法制備血清，用試劑盒中 配套的稀釋液稀釋，樣品按照 1：100 稀釋。（比 如：5μl 樣品加入到 495μl 樣品稀釋液中） 

6. 檢測步驟 

1). 取出所需要的板條。剩余的板條裝入自封袋中， 置于 2-8℃保存。 

2). 先向每孔中加入 100μl 稀釋后的待測樣品、陰性 質控（樣品稀釋液）、陽性質控（不稀釋），其中 陰性質控重復加兩孔,陽性質控重復加兩孔。 

3). 輕輕震動 10-20 秒混勻，貼上板貼。 

4). 置于 37℃溫育 30 分鐘?？鄢字幸后w，并用洗 液洗滌 5-7 次。在干凈的紙巾或毛巾上拍干，盡 量去除殘留的水分。 

5). 每孔中加入 100μl 的酶標記物，輕輕震動 10-20 秒混勻，貼上板貼。 

6). 置于 37℃溫育 30 分鐘?？鄢字幸后w，并用洗 液洗滌 5-7 次。在干凈的紙巾或毛巾上拍干，盡 量去除殘留的水分。 

7). 每孔依次加入 50μl 底物 A 和 50μl 底物 B，輕輕 震動 10-20 秒，置于 37℃避光反應 15 分鐘。 

8). 每孔加入 50μl 終止液，輕輕震動幾次混勻。使 藍色液體完全變為黃色液體。

9). 在 10 分鐘內，測量 450nm 處的吸光度(OD450)。 

7. 結果判斷 

1). 陰陽性質控平均值計算 陽性質控平均值 =（陽性質控 1+陽性質控 

2）/2 陰性質控平均值= （陰性質控 1+陰性質控 2）/2 2). 實驗有效性判定：應滿足， 陽性質控平均值 – 陰性質控平均值?0.500 陰性質控平均值?0.400 

3). 樣品 S/P 值計算： S/P=（樣品 A- 陰性質控平均值）/（陽性質控平均 值 – 陰性質控平均值） 

4). 結果判定： 1 陰性：S/P?0.20； 2 陽性：S/P?0.20。 

8. 儲存條件及效期 

2-8℃保存，有效期為 12 個月。

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